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コロナウイルス ナリンゲニン
www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2020.00970/full
天然フラボノイドであるナリンゲニンによるリソソーム内二孔チャネル（TPC）の阻害は、SARS-CoV-2感染症対策の選択肢となり得るか？
イタリア・ジェノバ、国立研究評議会生物物理学研究所
我々が推奨するのは、ウイルス感染においてエンドリソソーム二孔チャネルファミリー（TPC）が果たす役割と、これらのチャネルを阻害することでウイルスの細胞内経路を遮断することの実現可能性に注目することである。異なる時代に発表されたデータ、実験モデル、アプローチを横断的に分析することで、この提案を支持する直接的、間接的な証拠が得られた。
まず、櫻井ら（2015）は、エボラウイルス侵入経路中の宿主細胞へのエボラウイルスゲノムの放出にTPC2が必要であることを実証し、興味深いことに、テトラジンのようなTPC2阻害剤は、ウイルスのトラフィッキングをブロックし、試験管内試験（in vitro）および生体内試験（in vivo）のマウスの感染を予防する能力があることを証明した。
ナリンゲニンのTPC活性阻害
興味深いことに、我々の最近の証拠は、ヒトTPCチャネルの活性が、天然フラボノイド化合物、実際にはシトラスやトマトに存在するナリンゲニンによって阻害され得ることを示している(Pafumi et al., 2017)。
人工ウイルスを用いて得られたデータであるにもかかわらず、主に後期エンドソーム／リソソームに発現するTPC2と、主に初期エンドソームに局在するTPC1の両方のノックダウンおよび薬理学的阻害剤が、エンドリゾソーム系を介したコロナウイルスMERS-CoVの細胞内トラフィッキングを減衰させることが示されている。（Guナリンゲニンatne et al 2018）。
TPC2の他に、ナリンゲニンはまた、約500μMのIC50を持つTPC1活性の阻害剤であり、したがって、TPC2（約200μM）よりも大きい（Pafumi et al 2017）。
クロロキンと重複する作用機序
最近の試験管内試験（in vitro）でのエビデンスは、リソソソームのアルカリ化を介してSARS-CoV-2感染と戦うためのクロロキンの有効性に光を当てている（Touret and de Lamballerie, 2020; Wang et al.）
実際のところ、クロロキンは弱塩基として作用し、リソソソーム内に蓄積して酸性pHを下げ、それによってオートファジーの分解フラックスを停止させる(Homewood et al., 1972)。この証拠に沿って、興味深いことに、TPC2の損失は、メラノソーム／リソソームpHの増加をもたらすことが見出されている（Cang et al 2013；Ambrosio et al 2016；Bellono et al 2016）。
実際、TPC2は、ヒトメラノソーム内腔pHの制御に関与することが示された：実際に、TPC2-KOヒトメラノソームMNT-1細胞において、およびCRISPR／Cas9遺伝子編集システムによりTPC2ノックアウトを受けた初代メラノサイトにおいて、メラノソームの内腔は、対照細胞よりもアルカリ性である（Ambroshio et al 2016）。
Bellonoら（2016）はまた、TPC2がメラノソーム内腔へのV-ATPase H+輸送を強化するための陽イオンカウンターフラックスを産生するメラノソームpHを調節することができるという仮説を立てており、これはリソソソーム酸性化における内向き陽イオン電流の要件と一致している（Steinberg et al 2010）。
さらに、Cangら（2013）は、飢餓状態の後、TPC2-/-マクロファージのリソソームでアルカリ化へのシフトを実証した。
ウイルス複製の抑制
ウイルスの複製は、自然免疫からは見えない細胞小器官を修飾して複製のための場所を作るウイルスタンパク質によって誘導される特定の細胞区画で行われるため、膜融合機構は感染プロセスにおいて重要なイベントである。
この目的のために、ウイルスSタンパク質は2つのサブユニット、S1とS2から構成されており、S1はエントリーレセプターACE2を介してレセプター結合機能を提供し、S2は融合活性を提供する。
興味深いことに、サブユニットは、宿主細胞プロテアーゼ（システインプロテアーゼカテプシンBおよびL、フリンプロテアーゼおよび細胞セリンプロテアーゼTMPRSS2）によって完全なSから切断され、S1による受容体結合に続いて、S2の融合機構は、融合が起こるように、ウイルス小胞膜と細胞小胞膜をそのような近接状態に近づけるように作用する（AlsaadiおよびJones, 2019でレビューされている）。
この文脈では、TPCの開通は、膜融合機構を増強すると考えられている内反リソソーム膜においてナトリウム駆動型の強い脱分極を誘導することに留意すべきである（Wang et al 2012; Boccaccio et al 2014; Cang et al 2014; Lagostena et al 2017）。この仮説に沿って、ヒトTPC2をトランスフェクトしたCOS-1細胞は、チャネルの非機能型をトランスフェクトした細胞よりも大きなリソソソームを有する。
さらに、それは最近、TPCがナトリウムの流出に直接関与していることが示された（Freeman et al 2020）、それは、塩化物の動きと並行して、液胞表面対体積比の有意な変更を伴う内分泌液胞内の浸透質の放出を調節する。
したがって、TPCの阻害は、両方とも、エンドリソソーム系の発情性を損なうべきであり、正常なトラフィッキングを変化させ、これは、順番に、ウイルスの複製のための制限であり得る（AlsaadiおよびJones、2019）。
非常に最近、異なるアゴニストへの応答におけるTPC2のユニークな特徴が発表された（Gerndt et al 2020）ことにより、このチャネルの特性化が拡大し、それゆえに、ウイルスの細胞内経路を薬理学的に制御するための潜在的なアプローチの範囲が拡大している。
高い安全性
ヒトの食事に存在する主要なフラボノイドの一つであるナリンゲニンを、TPCsの特異的阻害剤として使用すること（Benkerrou et al 2019）は、いくつかの利点を有する。
ナリンゲニンは、生物学的膜を横断し、TPCが局在する細胞内コンパートメント（エンドソームおよびリソソーム）に到達することができる疎水性分子である。
ナリンゲニンの毒性は低く、1mM以上の濃度ではヒト肝細胞の生存能力に影響を与えず（Nahmias et al 2008）、マウスでは1,500mg/kgまでの用量を腹腔内注射しても、肝酵素の著しい上昇や動物の死を引き起こすことはなかった（Nahmias et al 2008）。
ウイルス抑制作用
興味深いことに、同じ研究（Nahmias et al 2008）では、感染したHuh7.5.1ヒト肝細胞株にナリンゲニンを200μMで添加すると、C型肝炎ウイルスの分泌を80%減少させる効果があることが示されている。
さらに、ナリンゲニン処理がウイルスの複製および感染を抑制するための有望な戦略であり得ることは、インフルエンザAウイルス、デングウイルスおよびジカウイルスに関する興味深い研究によってさらに確認されている（Dong et al 2015; Frabasile et al 2017; Cataneo et al 2019）。
異なる実験モデルにおけるウイルスプロテアーゼ活性の遮断を介したいくつかのフラボノイドおよびナリンゲニンの抗ウイルス効果も報告されている（de Sousa et al 2015; Lulu et al 2016; Lim et al 2017; Jo et al 2020）。
急性炎症・肺線維症の改善
注目すべきことに、ナリンゲニンは、急性炎症を改善することが示されており（Jin et al 2017）、肺線維症（Zhang et al 2018）と同様に、治療上の利点を示し得る。特に、Zengらは、ナリンゲニンが転写および転写後の両方のメカニズム（リソソーム機能を調節することによって）を介して炎症性サイトカイン産生を抑制し、その結果、マクロファージおよびT細胞によるTNF-αおよびIL-6の分泌を抑制することを実証した（Jin et al 2017; Zeng et al 2018）。
ナリンゲニンの治療可能性を分析する臨床試験が最近レビューされており（Salehi et al 2019）、ナリンゲニンの薬物動態および代謝に関する重要な臨床試験が報告されたばかりであり、この化合物の周りの強い関心を示している（Bai et al 2020）。
ACE2侵入に関わるTPC
この原稿がレビュー中である間に、Ouら（2020）による論文は、293/hACE2細胞におけるSARS-CoV-2侵入のためにTPC2がキープレーヤーであることを実証し、我々の知見と一致し、我々の仮説をさらに支持している。
結論として、これらの考察は、特定の分子標的であるTPCsについての視点を提供し、SARS-CoV-2感染性の薬理学的遮断としてのナリンゲニンの役割を裏付けるものであり、新規抗ウイルス療法としてのTPCs阻害の探索のさらなる支持を提供するものである。
抗ウイルス作用と抗炎症作用を有するフラバノン系化合物であるナリンゲニン
onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/ptr.6781
COVID -19に対する有望な治療戦略
要旨
2019年末、COVID-19と名付けられた新型インフルエンザ様コロナウイルスが世界保健機関（WHO）に認定された。現時点では、COVID-19に対する特定の治療法は存在しない。新しい証拠は、抗ウイルス剤に焦点を当てた治療法の選択肢が、COVID-19の症状を緩和するだけでなく、炎症反応の低下につながる可能性があることを示唆している。
フェノール化合物としてのフラボノイドは、その様々な生物学的特性のために注目されてきた。本レビューでは，柑橘類由来のフラボノイドであるナリンゲニンのCOVID-19に対する有望な効果と考えられる作用機序について検討した。
PubMed/Medline、Science direct、Scopus、Google Scholarの各データベースを確定キーワードで2020年3月までに検索した。
ここで検討されたエビデンスは、ナリンゲニンがCOVID-19のメインプロテアーゼである3-キモトリプシン様プロテアーゼ（3CLpro）を阻害し、アンジオテンシン変換酵素受容体の活性を低下させることで、COVID-19に対して治療効果を発揮する可能性を示唆している。
ナリンゲニンがCOVID-19に対して治療効果を発揮する可能性のある他のメカニズムの1つは、少なくとも部分的には、炎症反応を減衰させることによってである。いくつかのウイルスに対するフラバノンナリンゲニンの抗ウイルス活性も報告されている。
以上のことから，ナリンゲニンはCOVID-19に対して有望な治療法であると考えられる。
1 序論
新しい証拠は、抗ウイルス剤に焦点を当てた治療的選択肢が、炎症反応の減少につながるものだけでなく、COVID-19の症状を緩和する可能性があることを示唆している。フェノール化合物としてのフラボノイドの様々な重要な生物学的活性は、自然界において、抗ウイルス性、抗炎症性、治療性、抗菌性などを含むことが報告されている。
天然に存在するフラボノイドの中でも、その強力な生物学的役割により、ナリンゲニンは最も重要なフラボノイドの一つである。そこで、本研究では、抗ウイルス・抗炎症活性を有するフラボノイドであるナリンゲニンのCOVID-19に対する有望な効果と考えられる作用機序について検討することを目的とした。
3 フラボノイドおよびCOVID -19
利用可能な情報に基づいて、CoVエンコードタンパク質としての3-キモトリプシン様プロテアーゼ（3CLpro）およびパパイン様プロテアーゼ。したがって、これらのプロテアーゼを標的とすることは、COVID-19の治療のために極めて重要であるように思われる。
最近のデータは、フラボノイドと呼ばれるグループからのいくつかの代謝物が、これらのタンパク質の活性を阻害し得ることを示唆している。実際、フラボノイド化合物は、タンパク質の活性部位に付着して、タンパク質を不活性化する。さらに、フラボノイドは、カルコン、フラボン、フラボノール、およびイソフラボンを含む多くのサブグループを有することにより、植物色素の大きなクラスである。
フラボノイドは、抗酸化活性、フリーラジカル消去能、肝保護作用、抗炎症作用、抗がん作用、抗菌作用、および潜在的な抗ウイルス活性を含む複数の機能を有することが示されている。
これに関して、清水らは、フラボノイドがHCVサイクルの侵入段階をブロックすることにより、C型肝炎ウイルス（HCV）感染に対して作用し得ることを実証した。
柑橘類のフラボノイドとして、ナリンゲニンは、HCV感染に必要なアポリポタンパクB100。メカニズム的には、SARS-CoV-2に対するいくつかのフラボノイドの抗ウイルス活性は、3CLproをブロックする能力を介して媒介され得ることが文書化されている。
4 ナリンゲニン
フラボノイドの中でも、4′ 5 7-トリヒドロキシフラバノンの化学名を持つナリンゲニンは、抗酸化作用、抗炎症作用、抗ウイルス作用などの潜在的な生物学的活性から、主にフラバノンを中心とした最も重要なフラボノイドの一つと考えられている。ナリンゲニンは、柑橘類の苦味成分として知られるナリンゲニンのアグリコンである。
このフラバノンは、グレープフルーツ、レモン、オレンジ、ベルガモット、トマトなどの様々な果物および野菜に広く分布しており；したがって、食事からのその消費は比較的高くなり得る（Manchope, Casagrande, & Verri Jr. 現在までに、ナリンゲニンの経口バイオアベイラビリティー率はほぼ5.81%であり、その吸収は消化管内での受動的拡散と能動的輸送の両方を介して起こる。
さらに、Xuらは、ナリンゲニンの吸収率は、重殿部で47%、末端部で42%、空腸部で39%であることを示している。吸収後、ナリンゲニンはアルブミンと結合し、肝臓、大脳、腎臓、脾臓、心臓などの高灌流臓器に分布する。最後に、ナリンゲニンの代謝物は、胆道および尿路を介して排泄され得る。
いくつかの有益な健康効果を有するために、ナリンゲニンは、人間の健康を改善するために、異なる医薬製剤で使用することができる。
しかしながら、その限られたバイオアベイラビリティのために、ナリンゲニンの限られたバイオアベイラビリティを解決するために、ナリンゲニン負荷ナノ粒子のようないくつかの製剤が開発されてきた。
1996年に、ナリンゲニンの毒性についての最初の研究が行われた。単離されたラット肝核のモデル系において、ナリンゲニンは、DNA鎖切断とともに核膜脂質の濃度依存的な過酸化を誘発した。
また、ナリンゲニンは酸化してナリンゲニンフェノキシルラジカルを生成し、中程度の致死量LD(50) > 5,000 mg/kgを示した（Ortiz-Andrade et al. しかし、ナリンゲニンのようなフラボノイドのほとんどが比較的低いバイオアベイラビリティと迅速な代謝・排泄性のため、これらを摂取しても副作用は報告されていない。
これに関して、薬物動態試験では、ナリンゲニンをヒト被験者に経口投与した後、望ましくない効果や副作用は認められていないことが示されている。同様に、ナリンゲニンを含むポリフェノール性柑橘類乾燥エキスの有効性と安全性を評価した臨床試験でも、健康な過体重の被験者を対象とした副作用は認められなかった。
しかし、ナリンゲニンの安全性と毒性に関する十分な研究が行われていないため、このフラバノンは臨床現場では慎重に使用されるべきである。
4.1 ナリンゲニンの抗ウイルス効果
フラボノイドは、いくつかのタイプのウイルスに対していくつかの生物学的活性を有することが報告されている。HCV、チクングニアウイルス（CHIKV）、デングウイルス（DENV）、およびジカウイルス（ZIKV）などのいくつかのウイルスに対するフラバノンナリンゲニンの抗ウイルス活性が試験されている。
また、ヒト肝細胞によるHCV産生は、アポB100の発現および超低密度リポタンパク質（VLDL）の集合に依存していることが実証された（Huang, Sun et al. HCVに感染したHuh7.5.1ヒト肝細胞に200μMのナリンゲニンを投与すると、apoB100依存性のHCV分泌が抑制された。
さらに、ナリンゲニンは、感染細胞においてapoB mRNAのサイレンシングをもたらし、また、apoB100とHCVの両方の放出の70%の減少をもたらしたことが報告されている。別の研究では、ナリンゲニンの投与はHCVの分泌を阻害したが、細胞内ウイルスRNAまたはタンパク質レベルには影響を与えなかった。
感染性ウイルス粒子の集合もまた、ナリンゲニンによって阻害された。さらに、ナリンゲニンはペルオキシソーム増殖因子活性化受容体α。
HCV感染は、細胞代謝の刺激による酸化ストレスをもたらし、抗酸化酵素の活性が低下し、肝酵素であるアラニン・トランスアミナーゼ。
Goncalvesらは、C型肝炎患者における2.7mgのナリンゲニンの摂取が、脂質プロファイルおよび肝酵素ASTの大幅な低下をもたらすことを実証した。したがって、ナリンゲニンはHCV感染を改善することができ、用量依存的には、その投与は、複製に関与するウイルスタンパク質の産生をダウンレギュレートすることにより、CHIKV複製活性の侵入後の段階を抑制することができる。
CHIKV感染ハムスター腎細胞におけるCHIKV細胞内複製の予防は、6.818μMのナリンゲニンの投与によって引き起こされた。
しかしながら、別の研究では、感染したHuh7.5細胞へのナリンゲニンの投与は、すべてのDENV血清型の複製を阻害することができた。Cataneoらによる研究では、ヒトA549細胞におけるZIKV感染は、濃度依存的にナリンゲニンの投与によって阻害された。
また、感染後にヒト初代単球由来樹状細胞を処理した場合にも、ナリンゲニンの抗ウイルス活性が認められた。このことから、ナリンゲニンがウイルスの複製やウイルス粒子の集合を阻害することが示唆された。
また、ZIKVのNS2B-NS3タンパク質のプロテアーゼドメインとナリンゲニンとの相互作用により、ナリンゲニンの抗ZIKV活性を説明することができる。
伝統的な薬用植物である Guiera senegalensis の抗ウイルスバイオマーカーとして、ナリンゲニン投与（0.14 μg/mg）は、ウイルスエンベロープを標的とするか、逆転写酵素によって B 型肝炎ウイルス（HBV）のライフサイクルを阻害する可能性がある（Alam et al. ナリンゲニンの抗ウイルス効果を示した研究の概要を表1に示す。
4.2 ナリンゲニンの抗酸化活性および抗炎症活性
ナリンゲニンの抗酸化活性は、その構造中の水酸基置換基（OH）に起因する。これらの水酸基は、活性酸素種（ROS）および活性窒素種（RNS）に対して高い反応性を有する
ナリンゲニンは、フリーラジカルをスカベンジングし、用量依存的に脂質過酸化介在性酸化DNA損傷を防止することにより、その抗酸化活性を発揮する。
実験的研究において、ナリンゲニン処理は、チオバルビツール酸反応性物質（TBARS）、共役ジエン、および脂質ヒドロペルオキシド（LOOH）のレベルを減少させることが報告された。さらに、スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）、カタラーゼ（CAT）、グルタチオンペルオキシダーゼ（GPx）、グルタチオンレダクターゼ（GR）などの抗酸化酵素の活性を促進する可能性がある。
ナリンゲニンは、抗酸化作用に加えて、核内因子κB（NF-κB）シグナル伝達経路の阻害により、強力な抗炎症活性を発揮することが報告されている。
NF-κBは、腫瘍壊死因子α（TNF-α）、インターロイキン-6（IL-6）、シクロオキシゲナーゼ-2（COX-2）、インターロイキン-1（IL-1）、および誘導性一酸化窒素合成酵素（iNOS）などのいくつかの重要な炎症性タンパク質の発現を刺激する。
また、インビトロ研究およびインビボ動物モデルから得られた結果は、ナリンゲニンが、toll like receptor 4（TLR4）、TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOSなどのいくつかの炎症性マーカーの発現をダウンレギュレートし得ることを示している。の活性化を介して、NF-κB 経路を阻害し、AMP-activated protein kinase (AMPK)を活性化することで、複数の炎症性シグナル伝達経路の阻害に関与している。
5 他の重要な天然抗炎症剤と比較したナリンゲニンの利点
クルクミンは、炎症に関連する多くの転写因子、サイトカイン、接着分子、および酵素を調節することが示されている。これに関して、多数の研究により、様々なプロ炎症性疾患の予防および治療におけるクルクミンの潜在的な役割が明らかにされている。
熱帯植物Zingiber zerumbet Smithから単離されたZerumboneは、iNOS、COX-2発現、およびプロスタグランジンE2産生を阻害することにより、抗炎症作用を有することが報告されている。
チモキノンは、iNOSタンパク質の発現を抑制することにより抗炎症活性を発揮することが確認されているNigella sativaの主な有効成分と考えられている；Aesculus hippocastanum種子抽出物の主有効成分としてのエスシン；ピニトールのNF-κB阻害活性が知られている。
トドマツ葉から単離されたピニトール；ビタミンEファミリーのメンバーであるトコトリエノールも報告されている。
12g/日および2-3g/日の用量でのクルクミンおよびチモキノンの用量関連の副作用のために、望ましくない副作用のないナリンゲニンのようないくつかの新規な薬剤の使用を考慮することができる。
ナリンゲニンと比較して、ゼランボンは、真菌および細菌に対する抗菌効果、ならびにいくつかの抗炎症活性を示している。
しかし、ゼランボンの抗ウイルス効果はまだ報告されていない。エスシン、ピニトール、およびトコトリエノールは抗炎症活性および抗ウイルス活性を示すが、ヒトの健康に対するナリンゲニンの有益な生物学的効果は、より広範囲に及ぶようであ。
実際、フラボノイド化合物は、抗酸化作用、抗炎症作用、抗変異原性作用、抗菌作用、肝保護作用、および抗発がん性作用を含む多くのタイプの薬理学的活性を有することから、多くの注目を集めている。
我々の知る限りでは、クルクミンおよびチモキノンを除く上記の抗炎症活性を有するすべての天然物は、COVID-19メインプロテアーゼに対して阻害作用を示さなかった。しかし、ナリンゲニンはCOV 3CLproの酵素活性を阻害することができる。
6 ナリンゲニンのCOVID-19に対する作用の保護効果と考えられる機構
最近の研究では、ナリンゲニン、カエンフェロール、ケルセチン、およびアピゲニンなどのいくつかのフラボノイドが、SARS-CoV-2メインプロテアーゼの潜在的な阻害剤として作用する可能性がある最も推奨される化合物であることが示唆されている。これらの薬剤は、ネルフィナビルと類似したファーマコフォアを共有する。
プロテアーゼは、異なるタイプのウイルスの複製において本質的な役割を果たすので、それらは、COV複製を予防するための潜在的な薬理学的標的として考慮され得る。
SARS-CoV-2メインプロテアーゼまたは3CLproは、2本の鎖を含み、これがホモ二量体を作る。分子ドッキング解析研究では、ナリンゲニンが3CLpro鎖にリガンドとして結合し、その活性を阻害することが示された。
6LU7とナリンゲニンとのドッキングから得られた結合エネルギーは-7.99kcal/molであり、これは6LU7と形成されたH-結合の数と関連していた。ナリンゲニンのH-結合はCoVメインプロテアーゼ活性部位のアミノ酸ヒスチジン（His164）、グルタミン酸（Glu166）、アスパラギン酸（Asp187）、スレオニン（Thr190）と相互作用している。
全体として、ナリンゲニンの結合エネルギーが低いこととH結合の存在により、ナリンゲニン結合の親和性が高く、このフラバノンはCoV 3CLproの酵素活性を阻害することができる。
前述したように、CoVはACE2受容体を利用して宿主細胞に侵入することも指摘されており、したがって、ACE2活性を低下させることができる化合物は、COVID-19を有する患者の治療に有用である可能性がある。
最近の研究では、柑橘類フラボノイドの免疫調節効果、およびACE2活性に対するそれらの影響が調査されている。これらの化合物のACE2に対する結合親和性を分子ドッキングにより評価した。また、ナリンゲニンとACE2の相互作用を結合エネルギーで調べた。
その結果、ナリンゲニンはプロリン（PRO-146）、ロイシン（LEU-143）、リジン（LYS-131）を結合部位とするドッキングエネルギー-6.05kcal/molでACE2に結合することがわかった。
全体として、今回の研究結果は、ナリンゲニンとACE2の結合に必要なエネルギーが低いため、ACE2に容易に結合できることを示していた。著者らは、ナリンゲニンはCOVID-19に対する有望な治療戦略である可能性があると結論づけた。
新たな証拠は、SARS-CoV-2に感染した患者が、TNF-α、IL-1β、IL-10、インターフェロンγ（IFNγ）、および単球化学吸引性タンパク質-1（MCP-1）を含む高レベルのサイトカインを有していることを示している。
これらの知見は、サイトカインストームが疾患の重症度に寄与することを示している（Huang, Wang et al. これまでのところ、コルチコステロイドは、感染の初期の急性期に利用すれば有益である可能性がある。したがって、抗炎症剤の使用は、COVID-19の症状を緩和するための有望な治療アプローチと考えられる。
前述したように、ナリンゲニンは、強力な抗炎症活性を示し、COVID-19患者におけるTNF-α、IL-1β、IL-10、およびIFNγを含む炎症性マーカーのサイトカインレベルを減少させるための選択肢として認識され得る。また、リポ多糖類誘発性急性肺損傷に対するナリンゲニンの保護効果がラットで報告された。
2用量（50および100mg/kg/日）のナリンゲニンは、炎症性サイトカインの産生、肺水腫、好中球遊走、ミエロペルオキシダーゼ活性を有意に減衰させ、LPSを投与されたラットの肺における酸化的/窒素ストレスのマーカーを減少させた。
さらに、肺障害を有するラットへのナリンゲニン100mg/kgの投与は、NF-κBおよびCOX2の発現のダウンレギュレーションをもたらした。また、関節炎を有するWistarラットに5〜20mg/kgのナリンゲニンを投与すると、TNF-αおよびNF-κB mRNAレベルの低下をもたらしたことを明らかにした。
さらに、生体内試験（in vivo）試験では、ナリンゲニン投与後にNF-κB、TNF-α、IL-6、およびIL-1βの減少が示された。その上、10mg／kgのナリンゲニンを投与したマウスでは、TNF-α、IL-6、TLR4、iNOS、COX2、NADPHオキシダーゼ2（NOX2）、NF-κB、およびマイトジェン活性化プロテインキナーゼ。
TNF-αおよびIL-6の翻訳後阻害は、マウスマクロファージ細胞株RAW264.7に対するナリンゲニンの効果を評価した試験管内試験（in vitro）試験においても観察された。さらに、TNF-α、IL-6、およびIL-1βのmRNAおよびタンパク質発現レベルは、肥大性瘢痕を有する雌マウスにおいて、ナリンゲニンの投与によって減衰した。
まとめると、多くの証拠が、ナリンゲニンが炎症関連疾患を制御するための潜在的な治療薬であるという考えを支持している。したがって、ナリンゲニンがCOVID-19に対して治療効果を発揮する可能性がある他のメカニズムの1つは、少なくとも部分的には、炎症性応答を減衰させることによってである。
COVID-19に対するナリンゲニンの保護効果のために考えられるメカニズムの概要を図2に示す。
図2
COVID-19に対するナリンゲニンの作用のために考えられる機構
7 結論
結論として、ここで検討されたエビデンスは、ナリンゲニンがCOVID-19のメインプロテアーゼである3CLproを阻害し、ACE2受容体の活性を低下させることにより、COVID-19に対する治療効果を発揮する可能性を示唆している。
ナリンゲニンがCOVID-19に対して治療効果を発揮する他のメカニズムの一つは、少なくとも部分的には、炎症反応を減衰させることによるものである。フラバノンナリンゲニンの抗ウイルス活性は、いくつかのウイルスに対しても報告されている。
全体として，ナリンゲニンの良好な効果は，ナリンゲニンがCOVID-19に対する有望な治療戦略と考えられるという結論につながっている。しかし，ナリンゲニンの有効性は臨床試験で確認される必要がある。